Epidemiology of sporotrichosis in Venezuela.

BACKGROUND: Sporotrichosis is one of the most common subcutaneous mycoses in Venezuela. It is a granulomatous chronic infection with cutaneous or subcutaneous tissue lesions. Regional lymphatic involvement may be present; extracutaneous disease is rare. The causal fungus Sporothrix schenckii has been isolated from soil, vegetation, and animals on numerous occasions and in many localities throughout the world. The aim of this study is to describe clinical and epidemiological features of cases of sporotrichosis observed in Venezuela and review of the literature. PATIENTS AND METHODS: We included the demographic data, clinical features, diagnostic methods, treatment, and follow-up of patients with sporotrichosis from 1963 to 2009, diagnosed at the Department of Medical Mycology. RESULTS: One-hundred and thirty-three sporotrichosis cases were diagnosed. Most patients were under the age of 30 years (66.15%). In 61.6% of them, the mode of transmission was not identified. The predominant clinical form in this population was lymphocutaneous (63.15%). Direct microscopic diagnosis was performed in 123 cases, and 57.9% yielded positive results for asteroid body. CONCLUSIONS: Sporotrichosis is an endemic subcutaneous mycosis in Venezuela. There are no reports to this date of disseminated forms of the disease, even amongst patients with acquired immunodeficiency syndrome. Direct microscopic examination of wet mount slides with saline solution or distilled water in the search for asteroid bodies is paramount. Saturated sodium and potassium iodine solutions continue to be extremely efficacious and affordable to most of our patients, therefore our treatment of choice.

Paracoccidioidomicosis: clínica, epidemiología y tratamiento / Paracoccidioidomicosis: clinical considerations, epidemiology and treatment

Objetivo: caracterizar desde el punto de vista clínico, epidemiológico y de tratamiento, los pacientes con diagnóstico de paracoccidioidomicosis evaluados en la Consulta Externa de la Sección de Micología Médica del IMT-UCV y procedentes de otros hospitales del área de la Gran Caracas, cuyas muestras fueron procesadas en dicha Sección, entre los años 2001-2011. Métodos: estudio descriptivo de registros, donde se tomaron en cuenta las historias de los pacientes con diagnóstico de paracoccidioidomicosis. Resultados: la relación hombre:mujer obtenida fue de 6,5:1, sólo el 29,16% de los pacientes tenían ocupaciones agrícolas. Los síntomas más frecuentes fueron tos (50%) y pérdida de peso (45,06%) y los signos más comunes fueron lesiones en orofaringe (53,6%) y adenopatías (27,2%). 7,65% cursaron concomitantemente con infección por VIH/SIDA, 5,61% con tuberculosis y 6,63% con histoplasmosis. En cuanto al diagnóstico, el examen directo fue positivo en 87,5% de los casos, el cultivo en el 62,90% y la serología en el 88,46%. La mortalidad general fue de 4,11%. Discusión: La paracoccidioidomicosis es una enfermedad que puede ocurrir en pacientes inmunocompetentes e inmunocomprometidos; tiende a observarse ahora con mayor frecuencia en los pacientes con SIDA. El número de casos entre los pacientes del sexo femenino ha aumentado. La investigación acerca del lugar de origen, de la procedencia y la ocupación del paciente es importante a la hora de plantearse el diagnóstico. Esto debe ser tomado en consideración en un país endémico como el nuestro. Su diagnóstico es relativamente fácil en manos de personal entrenado.

Objective: to characterize from the clinical, epidemiological and treatment viewpoints, patients diagnosed with paracoccidioidomycosis and evaluated in the outpatient clinic of the Medical Mycology Section, at the IMT-UCV and from other hospitals in the greater Caracas area, whose samples were processed in this section between 2001-2011. Methods: descriptive study of records, taking into account the histories of patients diagnosed with paracoccidioidomicosis. Results: the male:female ratio obtained was 6.5:1; only 29.16% of the patients had agricultural occupations. The most common symptoms were cough (50%) and weight loss (45.06%), and the most common signs were oropharyngeal lesions (53.6%) and adenopathy (27.2%). Concomitantly, 7.65% had HIV/AIDS infection, 5.61% tuberculosis and 6.63% histoplasmosis. In terms of diagnosis, the direct exam was positive in 87.5% of cases, the culture in 62.90% and serology in 88.46%. Overall mortality was 4.11%. Discussion: paracoccidioidomycosis is a disease that can occur in immunocompetent and immunocompromised patients; currently, it tends to appear more frequently in patients with AIDS. The number of cases among female patients has increased. Research about the place of birth, the origin and the occupation of the patient is important when considering the diagnosis; this should be taken into consideration in an endemic country like Venezuela. Its diagnosis is relatively easy in the hands of trained personnel.

Estudio de la fasciolosis hepática humana y parasitosis intestinales en el caserío Mesa Arriba del municipio Carache, estado Trujillo,Venezuela / Study of human hepatic fasciolosis and intestinal parasitosis in the Mesa Arriba Village, Carache Municipality, Trujillo State, Venezuela

Se realizó un estudio clínico epidemiológico para determinar la ocurrencia de fasciolosis hepática humana y parasitosis intestinales en el caserío Mesa Arriba, municipio Carache. estado Trujillo, Venezuela, zona descrita como endémica para fasciolosis bovina, donde dos casos aislados, se han reportado en humanos. Se estudiaron 98 personas previo consentimiento informado, a quienes se les realizó una encuesta epidemiológica, examen físico, hematología, aminotransferasas, estudio coproparasitológico y serológico: ELISA con antígeno de excreción-secreción de adultos de Fasciola hepatica (AFhES) y “Western blot”(WB). Con base en los datos obtenidos, se conoció que el 88,8% de los participantes había consumido berro silvestre (Rorippa nasturtium aquaticum) y 59,2% tuvo contacto con ganado vacuno. En el estudio coproparasitológico se encontró que el 47,9% presentó algún tipo de parásito intestinal, 20,4% correspondió a helmintos, 15,3% a protozoarios y 12,2% a infecciones mixtas. No se encontraron huevos de Fasciola hepatica. El 18,4% de las personas mostró eosinofilia. Se obtuvo un suero positivo por el método de ELISA, con bandas inespecíficas al WB-AFhES. Se administró tratamiento específico para parásitos intestinales. No se demostró fasciolosis humana en este trabajo, a pesar de encontrar factores favorables a la infección, pero el mismo representó una aproximación a su estudio epidemiológico en el estado Trujillo.

A clinical-epidemiological study to determine the occurrence of human hepatic fasciolosis and intestinal parasitosis was done at the Mesa Arriba Village, Carache Municipality, Trujillo State, Venezuela, area which has been described as endemic for bovine fasciolosis and where two isolated cases have been reported in humans. The study included 98 persons who, after previously signing an informed consent form, answered an epidemiological survey and were physically examined and submitted to the following laboratory tests: complete hematology, aminotransferase, and coproparasitology and serology; ELISA using Fasciola hepatica adult excretion-secretion antigen (AFhES) and “Western Blot” (WB). Based on the results obtained, it was found that 88.8% of participants had consumed wild watercress (Rorippa nasturtium aquaticum) and 59.2% had contact with bovine cattle. The coproparasitological study showed that 47.9% had some type of intestinal parasite: 20.4% corresponded to helmints, 15.3% to protozoa, and 12.2% mixed infections. There were no Fasciola hepatica eggs; 18.4% of the individuals showed eosinophilia. The ELISA test gave one positive serum with non-specific WB-AFhES bands. Specific anti-intestinal parasite treatment was indicated. Human fasciolosis was not demonstrated in this study, in spite of finding favorable factors for this infection, but is represents and approximation to its epidemiological study at Trujillo State.

Histoplasmosis: a study of 158 cases in Venezuela, 2000-2005.

Histoplasmosis, a granulomatous disease caused by Histoplasma capsulatum, is endemic in Venezuela. We conducted the current study to appraise retrospectively the demographic data, clinical features, diagnostic methods, and treatment of patients with histoplasmosis from January 2000 to December 2005. We reviewed the medical records of outpatient cases with a diagnosis of histoplasmosis and considered clinical samples processed at our laboratory. We collected demographic, epidemiologic, and clinical data from each case as available, including results of any mycologic examinations performed. Treatment and outcome data were available for some patients. We assessed 158 cases of histoplasmosis: 103 (65.2%) patients came from the Caracas metropolitan area; 53 were associated with acquired immunodeficiency syndrome (AIDS), 14 with tuberculosis, and 8 with paracoccidioidomycosis. Six pediatric patients were malnourished. Epidemiologic data suggested histoplasmosis in most cases. Patients received treatment with itraconazole and/or amphotericin B. Our results may reflect changes in the epidemiology occurring in Venezuela, perhaps due to environmental changes and the presence of AIDS. Several mycologic exams are necessary to ensure a proper diagnosis. More reliable data and statistics on this infection are necessary to monitor outbreaks closely and to establish if there is an epidemic pattern.

Cryptococcus spp. en Venezuela y su relación con el biotipo del MicroScan® / Cryptococcus spp. in Venezuela and its relationship with the MicroScan® biotype

El lector del panel microbiológico automatizado autoScan®-4 detecta el crecimiento del hongo en diversos sustratos bioquímicos, presentes en los pozos de los paneles del MicroScan®. El propósito de este estudio fue relacionar el ¨biotipo¨ identificado por el MicroScan® con la especie causante de criptococosis, con el objeto de permitir una identificación en el menor tiempo posible. Se evaluaron 82 cepas de Cryptococcus spp. aisladas a partir de muestras clínicas entre 1995 y 2004. Para garantizar la pureza de las cepas, se realizó la identificación de las mismas por métodos convencionales; para identificar las especies se utilizó el medio L-canavanina-glicina-azul de bromotimol (CGB). Se utilizó también el panel de identificación rápida de levaduras del MicroScan®, con el fin de determinar el ¨biotipo¨. El MicroScan® reveló 27 diferentes ¨biotipos¨. De los 82 aislados tipificados con el uso del medio CGB, el 91,46 % correspondieron a C. neoformans y 8,54 % a C. gattii. No se encontró una diferencia significativa entre los ¨biotipos¨ y las especies (p>0,05). Sin embargo, se encontró significancia estadística entre las especies C. gattii y C. neoformans y la asimilación de p-nitrofenil-N-acetil-ß-D-glucosamina (NAG) (p<0,05). El panel de identificación rápida de levaduras del MicroScan® no fue capaz de diferenciar ambas especies.

The automated reader of the AutoScan® -4 microbiological panels detects fungi growth in various biological substrates present in the MicroScan® panel wells. The purpose of this study was to relate the biotype identified by the MicroScan® with the species causing the criptococcosis, in order to obtain identification in the shortest possible period. The evaluation included 82 Cryptococcus spp. strains isolated from clinical samples between 1995 and 2004. To guarantee the purity of the strains they were also identified by conventional methods; to identify the species we used L-canavanin-glycine-bromthymol blue medium (CGB). We also used the fast yeast identification MicroScan® panel with the purpose of determining the “biotype”. The MicroScan® revealed 27 different “biotypes”. Of the 82 isolates typed with the CGB medium, 91.46% corresponded to C. neoformans and 8.5% to C. gattii. No significant difference was found among the “biotypes” and the species (p<0,05). Nevertheless, there was a statistically significant difference between the assimilation of p-nitrophenil-N-acetyl-ß-D-glucosamine (NAG) (p<0.05) by the C. gattii and the C. neoformans species. The fast yeast identification MicroScan® panel was not able to differentiate between both species.

Determinación de un medio de cultivo apropiado para acelerar el crecimiento de paracoccidioides brasiliensis / Determination of an appropriate culture medium to accelerate the growth of paracoccidioides brasiliensis

A pesar de los avances de la tecnología en los últimos años, en una infección micótica la "prueba de oro" para realizar el diagnóstico definitivo, es el aislamiento del agente causal mediante la práctica del cultivo de una muestra clínica; por lo que a través de los años han sido elaborados numerosos medios de cultivo, en los cuales se han utilizado desde sustancias naturales, hasta otras artificiales de composición más compleja. El problema más importante al cual se enfrentan los laboratorios de micología médica, es que los hongos productores de micosis profundas en Venezuela, tienen la propiedad de ser de lento y difícil crecimiento, inclusive hasta 8 semanas son necesarias para poder visualizar estructuras características del agente investigado. Es por ello que es importante desarrollar un medio de cultivo que aumente la sensibilidad de recuperación de hongos dimorfos, como el P. brasiliensis, a partir de muestras clínicas y provenientes de la micoteca; y que a su vez pueda ser utilizado para la obtención de la fase de levadura en forma eficaz. Se procesaron dos muestras clínicas y dos cepas provenientes de la Micoteca de la Sección de Micología Médica del Instituto de Medicina Tropical, los cuales fueron sembrados en: Sabouraud, agar cerebro corazón (brain heat), agar Kelley y agar Kelley Modificado a temperatura ambiente para obtener la fase micelial y a 37° C para incluir la transformación térmica y así recuperar la fase de levadura. En relación al crecimiento a temperatura ambiente, de las muestras clínicas se observó el crecimiento de una colonia característica de P. brasiliensis entre el séptimo día y la sexta semana en el siguiente orden: agar Kelley, agar Kelley modificado, agar brain heart y Sabouraud. En el caso de dos cepas provenientes de la micoteca a su desarrollo fue casi similar en Agar Kelley y Brain heart. Para la transformación a fase de levadura ésta se obtuvo antes de los 7 días con el agar Kelley Modificado y el agar Kelley.

Identificación de histoplasma capsulatum en muestras clínicas mediante la técnica de PCR en dos rondas / Detection of histoplasma capsulatum by nested-PCR in clinical specimens

La histoplasmosis es una micosis profunda de distribución mundial cuyo diagnóstico se fundamenta en estudios clínicos, micológicos e inmunológicos. La identificación del agente etiológico en muestras biológicas es difícil de realizar. Se evaluó la técnica de PCR en dos rondas para identificar ADN de Histoplasma capsulatum en muestras clínicas (sangre y médula ósea) y cultivos del hongo. Se ensayaron 3 métodos de aislamiento de ADN basados en los reactivos Tiocianato de Guanidina, Cloruro de Bencilo y Triton-X-100. La técnica de aislamiento con Tiocianato de guanidina resultó de fácil aplicación en muestras clínicas. Sin embargo, se obtuvo un mayor rendimiento de ADN con el reactivo Triton-X-100. La aplicación de la prueba de PCR generó un amplificado de 210 pares de bases el cual fue identificado tanto en las cepas de referencia de H. capsulatum como en 5 muestras de sangre y 2 muestras de médula ósea. Para confirmar la especificidad de la prueba se analizaron cepas de otros hongos no relacionados, Paracoccidioides brasiliensis, Candida glabrata, Cryptococcus neoformans y Coccidioides immitis (C posadasii) las cuales resultaron negativas. La técnica de PCR mostró una sensibilidad de hasta 10pg de ADN de H. capsulatum confirmándose así su utilidad como herramienta de diagnóstico molecular.

El embarazo como única condición subyacente de una criptococosis: a propósito de 2 casos / The pregnancy like only underlying condition of a criptococosis: a purpose of 2 cases

Rara vez el embarazo ha sido asociado con criptococosis. Se presentan 2 pacientes VIH seronegativas, hospitalizadas en el Hospital Universitario de Caracas por presentar criptococosis meníngea, en las cuales la única condición subyacente fue el embarazo. Se hace una revisión de la literatura.

Susceptibilidad antifúngica en dermatofitos / Antifungal susceptibility of dermatophytes

No existe hasta los momentos una prueba estandarizada para realizar la susceptibilidad antifúngica de los dermatofitos. El objetivo de este estudio fue implementar la técnica de los pozos de difusión para el estudio de la susceptibilidad de los dermatofitos. Se utilizaron un total de 100 aislados de dermatofitos (74 Trichophyton rubrum, 18 Trichophyton mentagrophytes, 1 Trichophyton tonsurans, 5 Microsporum canis y 2 Epidermophyton floccosum) provenientes de muestras clínicas aisladas e identificadas en la Sección de Micología Médica, IMT. Se empleó la técnica de los pozos de difusión con los siguientes antimicóticos: Griseofulvina, Terbinafina, Fluconazol e Itraconazol. Se aplicaron los criterios de interpretación acordados por la NCCLS. El inóculo, se estandarizó utilizando el peso como unidad. El medio Agar Staib demostró ser el más adecuado, al obtenerse un mejor crecimiento de los aislados en un 97%. Esta es la primera vez, que se utiliza el peso como medida para cuantificar el inóculo en los dermatofitos. La mayor sensibilidad se evidenció ante Terbinafina seguido de Griseofulvina e Itraconazol. No se demostró sensibilidad alguna ante el Fluconazol. Sin embargo se requieren más estudios en los cuales se relacione la susceptibilidad "in vitro" con los resultados "in vivo".

Estudio de 40 casos de Histoplasmosis en niños y revisión de la literatura / Study of 40 cases of histoplasmosis in children and literature review

En niños, la histoplasmosis es la micosis profunda más frecuente en nuestro país. No es de denuncia obligatoria, por lo que existe un gran subregistro. El objetivo de este trabajo es reportar los casos de histoplasmosis diagnosticados en niños en la Sección de Micología Médica del Instituto de Medicina Tropical (IMT). Universidad Central de Venezuela (UCV), entre julio 2004 y julio 2005, con la finalidad de dar a conocer los principales aspectos de esta entidad a la población médica, en especial a los pediatras. Se evaluaron los pacientes en edad pediátrica (0-18 años) que fueron traídos a la consulta de la Sección y las muestras biológicas que se recibieron en el lapso antes mencionado. Se realizó examen mitológico y se siguió la evolución con el tratamiento. Se encontraron 40 casos de histoplasmosis con edades comprendidas entre 14 días y 16 años, 15 del genero femenino y 25 del genero masculino. Seis eran menores de 1 año, la mayoría (25 casos) provenientes del Distrito capital. Dieciocho presentaron la forma de histoplasmosis diseminada de los cuales 4 fallecieron. Quince presentaron la forma pulmonar aguda y 5 meningitis crónica. Seis pacientes estaban desnutridos, 4 presentaron VIH y 4 tenían tuberculosis. En 18 pacientes se desconoce comorbilidad. Nueve pacientes tenían aumento de la VSG, 7 anemia, 5 leucopenia y 2 pancitopenia. Los datos epidemiológicos fueron sugestivos de histoplasmosis en todos los casos. Se reportaron 40 casos de histoplasmosis en niños, diagnósticados en la Sección de Micología Médica del IMT-UCV. La forma clínica más frecuente fue la histoplasmosis diseminada. Ante la presencia de niños con las características descritas, debe pensarse en histoplasmosis como diagnóstico diferencial, relacionando la epidemiología, clínica, radiología y exámenes de laboratorio. Es necesario practicar mitológico para confirmar la presencia de esta enfermedad.

Identification of cryptococcus neoformans isolates using staib agar without creatinine

En micología, el cultivo es la mejor manera de realizar el diagnóstico definitivo de una micosis. Muchos tipos de medios han sido desarrollandos y modificados de tal fin, utilizando las propiedades bioquímicas de los hongos para reconocerlos. Este último ha sido ampliamente usado para identificación del género cryptococcus y en otros hongos. El objetivo de este estudio fue demostrar la utilidad del agar Staib y de un medio de Staib modificado, sin creatinina, en el aislamiento e identificación de hongos patógenos. Cuarenta y seis aislados de Cryptoccocus neoformans más un control fueron identificados por criterios morfológicos y bioquímicos, usando la prueba de ureasa (agar urea christensen) y cultivo en medio Sablac. Las cepas fueron transferidas a placas de agar Staib estandar y de agar Staib sin creatinina. Las placas fueron evaluadas a tempreratura ambiente (26-28ºC) durante una semana y luego fueron evaluadas las características morfolóficas de las colonias y producción de fenoloxidasa. En 43 (91.5 por ciento) de las cepas estudiadas se observó producción de fenoloxidasa (presencia de colonias marrones) tanto en el agar estandar como en el agar sin creatinina. El agar Staib sin creatinina es un medio excelente para identificación de C. neoformans, con las ventajas de un bajo costo y fácil preparación

Candida spp en pacientes VIH/SIDA / Candida spp in patient VIH/SIDA

La candidiasis es la infección fúngica más frecuente en pacientes VIH seropositivos y con SIDA, siendo C. albicans la especie que predomina. En estos pacientes, la candidiasis se manifiesta más comúnmente como orofaringitis, con una incidencia que oscila entre 45 por ciento y 95 por ciento de todos los casos. En Venezuela son pocos los reportes que existen acerca de esta entidad en pacientes VIH/SIDA, por lo cual uno de los objetivos de esta investigación fue evaluar este aspecto. Se estudió una cohorte de 402 pacientes con VIH/SIDA con o sin orofaringitis y con o sin tratamiento antifúngico. Las especies de Candida más importantes aisladas fueron: C. albicans (80,41 por ciento), C. tropicalis (8,78 por ciento), C. glabrata (4,90 por ciento), C. dubliniensis (3,26 por ciento). Se evaluó la susceptibilidad de los diferentes aislados a las drogas antifúngicas con el método de la NCCLS y el método de los pozos de difusión. El 37,5 por ciento C. albicans provenientes de pacientes con tratamiento antimicótico fueron resistentes al fluconazol (resistencia secundaria) y 23,95 por ciento mostraron también resistencia al itraconazol (resistencia cruzada). Los ailados obtenidos se tipificaron a través de la reacción en cadena de la polimera (RAPD) y se estableció la que la misma representa una técnica útil para diferenciar Candida spp. En esta cohorte de pacientes evaluados, las características clínicas y demográficas son similares a las reportadas mundialmente, y que desde la introducción del TARGA, la frecuencia de las infecciones por Candida spp disminuyó. Hasta la presente fecha, en Venezuela no se había reportado el hallazgo de C. dubliniensis (3,26 por ciento).

Candida dubliniensis en pacientes VIH/SIDA: en Venezuela / Candida dubliniensis in patient VIH/SIDA: in Venezuela

En los últimos años, las enfermedades producidas por hongos han ido en aumento, debido en gran parte a la aparicón del síndrome de inmunodeficiencia adquirida. El incremento de estas micosis ha sido más notable en aquellas causadas por especies del género Candida, las cuales trae consigo una elevada morbi-mortalidad. Otras especies no-albicans tales como, Candida tropicalis, Candida parapsilosis, Candida glabrata, Candida krusei, Candida lusitaniae, Candida guillermondii y más recientemente Candida dubliniensis pueden estar involucradas en cualquier tipo de candidiasis. Esta última especie presenta características fenotípicas similares a C. albicans, siendo una de la más resaltante la producción de abundantes clamidoconidias. Candida dubliniensis al estar estrechamente relacionada desde el punto de vista fenotípico con C. albicans, hace dificultosa su identificación, sobre todo con los métodos convencionales de laboratorio y usualmente se ha identificado erróneamente como C. albicans. Actualmente existen múltiples opciones para una identificación presuntiva de C. dubliniensis, como es el caso de la utilización de paneles de identificación automatizada, medios cromogénicos (CHROMagar Candida), el uso del agar Staib, la prueba de la termotolerancia, entre otros; adicionalmente se pueden utilizar métodos de biología molecular los cuales son más específicos y sencibles para realizar una identificación definitiva de C. dubliniensis, permitiendo así por primera vez, la identificación fenotípica y genotípica de C. dubliniensis y el reporte de casos de candidiasis orofaríngea originada por C. dubliniensis en pacientes virus de inmunodeficiencia humana/síndrome de inmunodeficiencia adquirida en nuestro país.

Detection of Candida dubliniensis in Venezuela.

Over the past decades there has been a significant increase in fungal infections caused by Candida species, and continues to be common in immunocompromised individuals infected with the human immunodeficiency virus (HIV). Although Candida albicans remains the fungal species most frequently isolated as an opportunistic oral pathogen, other non-albicans are often identified in this cohort of patients, including C. dubliniensis. This yeast is closely related to and shares many phenotypic characteristics with C. albicans. Colonies of these two species appear morphologically identical when not grown on special media. The shared phenotypic characteristics of C. dubliniensis and C. albicans suggest that many C. dubliniensis isolates may have been misidentified as C. albicans in the past. The present studies aim is to recover and identify C. dubliniensis, and presumptive clinical C. albicans, from the oral cavities of HIV-seropositive individuals, comparing conventional media to obtain a simple, low-cost and reliable identification system for C. dubliniensis. A total of 16 isolates (3,98%) had been obtained from 402 HIV infected individuals with recurrent oropharyngitis and were identified as C. dubliniensis. Out of these C. dubliniensis isolates 19% were resistant, with MICs above 64 microg/ml to fluconazole. This constitutes, to the authors knowledge the first recovery of this organism in Venezuela.

Tinea nigra: report of twelve cases in Venezuela.

Tinea nigra is a superficial mycotic infection produced by Hortaea werneckii, formerly known as Phaeoannelomyces werneckii, formerly known as Exophiala werneckii, and Stenella araguata, the latter autochthonous in Venezuela, it was first described and named as Cladosporium castellanii in 1973. The present report describes 12 cases in the period of 1972-2002, diagnosed at the Medical Mycology Section at the Tropical Institute of the Universidad Central de Venezuela, in Caracas. This mycosis is more prevalent among young people, with fair skin, from 3 to 28 years of age, who visited beaches and in whom the lesions are more evident. Out of these 12 patients, 8 (66.66%) had Phaeoannelomyces werneckii as the causal agent and 2 (16.67%) Stenella araguata was isolated. Two patients had more than one macule, and curiously in these cases, each lesion was caused by a different species of the aforementioned fungus.

Extracción simplificada de ADN en especies de Candida / DNA simplified extraction in Candida species

La pared de doble contorno de las levaduras hace difícil que se realice la lisis para la extracción del ADN genómico en Candida spp. Existen numerosos protocolos que se basan en métodos enzimáticos y/o físicos. Sin embargo son laboriosos y relativamente caros. El objetivo de este trabajo fue simplificar la extracción de ADN para usar el homogenato obtenido en la amplificación aleatoria de segmentos de ADN (RAPD) asimétrico con un cebador reverso corto CAND R de la secuencia repetitiva de C. albicans CARE 2. Mediante choque térmico se logró obtener suficiente cantidad de ADN de las diferentes especies de Candida para reproducir los diferentes patrones de bandas características de cada una de las especies.

Identificación de cryptococcus sp: mediante el auxonograma modificado por araujo / Identification of crytococcus sp: througgh the auxonogram method modified by araujo

Se identificaron 43 cepas de C. neoformas, mediante el uso de la prueba de auxonograma utilizando la técnica de Araujo, la cual es una modificación del método de Beijerinck. Los resultados obtenidos con esta técnica fueron similares a lo observado con la identificación automatizada con el MicroScan® DADE BEHRING. Los datos demostrados nos permiten afirmar que la técnica evaluada es efectiva, poco costosa y fácil de utilizar en un laboratorio de pocos recursos

Coccidioidomicosis diseminada en pacientes infectados con el virus de inmunodeficiencia humana: reporte de dos casos y revisión de la litertura / Coccidioidomicosis disseminated in patients infected with the human immunodeficiency: report of two cases and revision of the literature

En Venezuela las zonas xerófilas del estado Falcón, Lara y Zulia son endémicas para Coccidioides immitis. Dentro de las micosis profundas es la menos frecuente; según Albornoz se describieron 61 casos de coccidioidomicosis hasta 1966. En zonas endémicas, la coccidioidomicosis suele ser una enfermedad oportunista frecuente en pacientes con virus de inmunodeficiencia humana (VIH). Por lo tanto, podría esperarse una alta incidencia de esta entidad en pacientes infectados con el VIH, sin embargo, hasta donde sabemos, no se ha reportado ningún caso en la literatura local. En este trabajo se describen dos casos de pacientes VIH positivos que presentaron coccidioidomicosis diseminada.

Well diffusion for antifungal susceptibility testing.

INTRODUCTION: The increasing clinical and microbiologic resistance of Candida spp. isolates to several antifungal agents is becoming a serious problem. It is now reasonable to propose the use of antifungal susceptibility testing in Candida spp. isolates from patients who have failed conventional therapy, before the selection of an empirical therapy. METHODS: One hundred and fifty eight isolates of Candida spp. were evaluated simultaneously by broth microdilution (NCCLS standard) and well diffusion testing (WD), a diffusion method similar to disc diffusion. RESULTS: According to the Wilcoxon Signed Ranks test performed, there was no significant difference (p>0.05) between both methodologies for all antifungal agents tested (fluconazole, itraconazole, posaconazole, caspofungin and amphotericin B, with C. tropicalis, C. krusei, C. dubliniensis, C. guillermondii, C. parapsilosis, C. albicans and C. glabrata). A significant difference was observed when comparing well diffusion with NCCLS for fluconazole WD 80% (p=0.008) in C. glabrata, as well as WD 80% (p=0.002) and WD 50% (p=0.002) in C. albicans. CONCLUSIONS: The well diffusion test is simple, easy to reproduce, inexpensive, easy both to read and interpret, and has a good correlation to the reference NCCLS microdilution test and may represent an alternative method for antifungal drug susceptibility testing of Candida spp., mainly in laboratories with few resources.